體外培養(yǎng)細(xì)胞的增殖活力受多種因素的影響，如某些細(xì)胞因子可促進(jìn)細(xì)胞的增殖，而一些藥物如抗癌藥物則可抑制細(xì)胞的生長，甚至誘導(dǎo)細(xì)胞的死亡。目前，細(xì)胞活力檢測(cè)方法中，CCK8法是一種方便、靈敏、快速、無放射性、重復(fù)性好檢測(cè)方法。

此外，CCK8檢測(cè)亦可用于繪制細(xì)胞的生長曲線，一定數(shù)量的細(xì)胞接種后，連續(xù)測(cè)量7天的吸光度，然后將7天測(cè)量所得的吸光度值標(biāo)于坐標(biāo)紙上，再將各點(diǎn)連成曲線，即可得生長曲線。

包裝清單：

CCK8細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒儲(chǔ)存條件：

-20℃保存，二年有效；4℃保存，一年有效

操作說明：

1、細(xì)胞活性檢測(cè)

① 在96孔板中接種適量的細(xì)胞懸液（100ul/孔），在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時(shí)；

② 向每孔中加入10ul CCK-8溶液；

③ 繼續(xù)放于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)1-4小時(shí)；

④ 用酶標(biāo)儀測(cè)定在450nm的吸光度。

2、細(xì)胞增殖-毒性檢測(cè)

① 在96孔板中接種適量的細(xì)胞懸液（100ul/孔），在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時(shí)；

② 在96孔板中加入不同濃度的生長因子、細(xì)胞因子或藥物等；

③ 將96孔板置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)適當(dāng)?shù)臅r(shí)間；

④ 向每孔中加入10ul CCK-8溶液；

⑤ 繼續(xù)放于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)1-4小時(shí)；

⑥ 用酶標(biāo)儀測(cè)定在450nm的吸光度。

注意事項(xiàng)

1、向96孔板接種細(xì)胞時(shí)，應(yīng)前后、左右搖晃培養(yǎng)板，使細(xì)胞在孔中分布均勻，避免細(xì)胞堆集在孔的中央生長。

2、CCK-8 的培養(yǎng)時(shí)間一般為 1-4 小時(shí)，但在培養(yǎng) 30 分鐘左右即可取出肉眼觀察顯色程度，根據(jù)細(xì)胞種類而定，需要摸索條件，CCK-8 的最佳反應(yīng)時(shí)間以具體顯色的最佳時(shí)間為準(zhǔn)。

3、加入CCK8溶液時(shí)避免氣泡的產(chǎn)生，從而影響吸光度。

酶標(biāo)儀讀取吸光度時(shí)可使用430-490nm之間的濾光片，但450nm 濾光片的檢測(cè)靈敏度最高。

4、CCK8的檢測(cè)依賴于脫氫酶催化的反應(yīng)，所以還原劑（例如一些抗氧化劑）會(huì)干擾檢測(cè)，如干預(yù)因素具有還原性，應(yīng)在檢測(cè)前通過換液的方法予以去除。

5、培養(yǎng)基中酚紅對(duì)吸光度的影響，可以通過扣除空白孔中本底的吸光度而消除，因此，不會(huì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果造成影響。

6、所測(cè)吸光度值范圍應(yīng)在0.4-2之間，此范圍內(nèi)的吸光度值與細(xì)胞的數(shù)量與活力之間的線性關(guān)系較為明顯，如果超出此范圍，應(yīng)相應(yīng)增加或減少接種細(xì)胞的數(shù)量。

備注：

         產(chǎn)品信息可能會(huì)有優(yōu)化升級(jí)，請(qǐng)以實(shí)際標(biāo)簽信息為準(zhǔn)。

本產(chǎn)品僅供科研使用。請(qǐng)勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請(qǐng)勿存放于普通住宅區(qū)。

為了您的安全和健康，請(qǐng)?jiān)趯?shí)驗(yàn)過程中做好防護(hù)工作。